熱滅活胎牛血清會存在哪些沉淀物？ 血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞的起到某些保護作用。
基于多年的實驗研究，用于細胞培養(yǎng)的熱滅活胎牛血清以及其它血清中可能會存在以下種類的沉淀物有以下三種:
1、纖維蛋白，它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物，可以達到1-2mm，可以用肉眼觀察到。因為血清都是在低溫下進行收集和快速處理的，一些纖維蛋白原（可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體）在處理過程中仍然處于溶解狀態(tài)，當(dāng)經(jīng)過后的過濾分裝后，就會在瓶中凝結(jié)出現(xiàn)纖維蛋白沉淀。
2、磷酸鈣，它也是常見的一種沉淀物，通常會使血清出現(xiàn)渾濁，并且在37°C培養(yǎng)的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點，這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動，因此經(jīng)常被誤認為是微生物污染。
3、膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)。他們也是熱滅活胎牛血清中出現(xiàn)沉淀物的常見原因。
影響：
1、細胞生長，我們的試驗以及經(jīng)驗表明沉淀物不會影響細胞培養(yǎng)，我們的客戶以及其它血清生產(chǎn)商也證明了這一點。
2、過濾，如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物，血清將很難過濾。一般說來，因為在血清生產(chǎn)時后已經(jīng)經(jīng)過100nm或者40nm的過濾處理，并且經(jīng)過了嚴格的無菌檢測，因此不推薦再過濾用于細胞培養(yǎng)的血清。在實驗室中沒有必要再過濾處理血清，在大規(guī)模的細胞培養(yǎng)中往往將血清直接加到培養(yǎng)基中一起過濾。
3、污染，磷酸鈣往往被誤認為微生物污染而引起爭端。研究者可能會在血清中觀察到一些絮狀的沉淀，因此就會比較警覺的去做無菌試驗，將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天，結(jié)果可能會觀察到更多的絮狀沉淀，因此就斷定血清被污染了。并且當(dāng)研究者將血清樣品放在倒置顯微鏡下觀察時往往可以看到一些可以運動的小黑點，因此就更加確認是血清被污染了。于是，研究者就會花費更多的時間和精力來和生產(chǎn)商確認，但終確定血清沒有被污染而只是沉淀。為了避免這些問題的發(fā)生，我們建議不要直接將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察是否有菌，而是將熱滅活胎牛血清加到瓊脂板上進行培養(yǎng)以觀察是否有細菌生長。另外，也可以進行革蘭氏染色，在油鏡下觀察，以確認是否有污染。
